دانلود پایان نامه : اثرات لینالول بر الگوی فعالیت نورونی حلزون و بر همکنش با مکانیسم های سلولی دخیل در القای فعالیت صرعی | ... | |
(ممکن است هنگام انتقال از فایل اصلی به داخل سایت بعضی متون به هم بریزد یا بعضی نمادها و اشکال درج نشود ولی در فایل دانلودی همه چیز مرتب و کامل است) چکیده لینالول، مونوترپن الکلی است که در اسانس روغنی تعدادی از گیاهان آروماتیک وجود دارد. این ترکیب اثرات ضد التهابی، ضد درد و انواعی از اثرات بیولوژیک بر سیستم عصبی را داراست. در تحقیق حاضر، ما تکنیک ثبت داخل سلولی را برای مطالعه اثرات لینالول بر فعالیت نورونهای حلزون به کار بردیم. اعمال لینالول (mM 1/0) به سرعت فرکانس پتانسیلهای عمل خودبهخودی را افزایش و شیب فاز رپلاریزاسیون و دوره و دامنه پتانسیل هایپرپولاریزان متعاقب را کاهش داد. لینالول همچنین دامنه پتانسیل عمل را کاهش داد اما به نظر میرسد این تاثیر نتیجه دپلاریزاسیون آهسته غشاء باشد و نه مهار مستقیم کانالهای سدیمی زیرا با تثبیت ولتاژ استراحت غشاء در حدود کنترل (با تزریق مداوم جریان منفی) کاهش دامنه پتانسیلهای عمل هم حذف گردید. اعمال لینالول ( mM2/0) به تدریج الگوی فعالیت را از حالت منظم به فعالیت انفجاری تغییر داد که این الگوی فعالیت بعد از شستشو با رینگر نرمال به آهستگی برگشتپذیر بود. فعالیت انفجاری در حضور نیفدیپین (مهارکننده اختصاصی کانالهای کلسیمی L-type) کاهش و در حضور نیکل کلرید (مهارکننده غیر اختصاصی کانالهای کلسیمی) حذف شد. افزودن H89 (مهارکننده پروتئین کینازA) و کلریترین (مهارکننده پروتئین کینازC) فعالیت انفجاری القاء شده توسط لینالول را حذف کرد و سبب بازگشت پتانسیلهای عمل منفرد و منظم شد. این نتایج پیشنهاد میکند لینالول میتواند فعالیت صرعی را بویژه از طریق مهار کانالهای پتاسیمی در نورونهای حلزون القاء نماید. به نظر میرسد تاثیر مستقیم لینالول بر کانالهای یونی در تغییر فعالیت نورونها نقش داشته باشد که با شروع سریع تاثیر لینالول مطابقت دارد، اما با توجه به تاثیر مهارکنندههای پروتئین کینازها این تاثیر به تعدیل غیرمستقیم از طریق فسفریلاسیون کانالهای یونی نیز وابسته است. کلمات کلیدی: پتانسیل عمل، لینالول، نورون حلزون، فعالیت انفجاری، کانالهای یونی فهرست مطالب عنوان……………………………………………………………………………………………………..صفحه فصل اول: مقدمه 1-1) بیان مساله ………………………………………………………………………………………………..2 1–2) دلایل استفاده از نورونهای حلزون ………………………………………………………..…… 5 فصل دوم: مروری بر تحقیقات پیشین 2-1) صرع ……………………………………………………………………………………………………… 8 2-2) اسانسهای گیاهی …………………………………………………………………..……………… 9 2-3) اثرات بیولوژیک اسانس های گیاهی………………………………………………………… 10 2-3-1) اثرات سیتوتوکسیک اسانسها ………………………………………………………….. 10 2-3-2) اثرات موتاژنیک اسانسها در سطح هسته و سیتوپلاسم ……………………… 10 2-3-3) اثرات انتی موتانژنیک اسانسها…………………………………………10 2-3-4) اثرات سرطانزایی اسانسها…………………………………………….11 2-4) ترکیبات اسانسها و عملکرد آنها روی سیستم عصبی مرکزی و محیطی…… 11 2-4-1) اکالیپتول …………………………………………………………………………………………… 12 2-4-2) اوجنول ……………………………………………………………………………………………..13 2-4-3)منتول ………………………………………………………………………………………………. 13 2-4-4) سیترونلول ………………………………………………………………………………….……. 14 2-4-5) لینالول……………………………………………………………………………………………….15 2-5) کانالهای یونی و مشارکت آنها در فعالیت الکتریکی نورون ها…………………… 17 2-5-1)کانال های کلسیمی …………………………………………………………………………. ….17 2-5-2) کانالهای پتاسیمی ……………………………………………………………………….……. 19 2-5-2-1) کانال های پتاسیمی وابسته به ولتاژ ………………………………………………… 19 2-5-2-2) کانالهای پتاسیمی وابسته به کلسیم ………………………………………………. 20 2-5-3) کانالهای سدیمی ………………………………………………………………………. ……… 21 2-5-3-1) جریانهای سدیمی گذرا و مداوم ………………………………………..………….. 22 2-6) تعدیل کانال های یونی توسط فسفوریلاسیون ………………………………………… 23 2-6-1) گیرنده متابوتروپیک……………………… ……………………………………………………23 2-7) پروتئین کینازها……………………………………………………………………………………..25 2-7-1) PKA و اثر بر کانال های یونی ……………………………………………………..…….. 25 2-7-2) PKC و اثر بر کانال های یونی ……………………………………………………………. 27 فصل سوم: مواد و روشها 3-1) حیوانات ………………………………………………………………………………..……………… 30 3–2) تشریح و آماده سازی گانگلیون عصبی جهت ثبت …………………………………… 31 3-3) محلولها و داروها ………………………………………………………….……………………. 32 3-4) ثبت داخل سلولی ………………………………………………………………………………… 32 3-5) مراحل آزمایش ……………………………………………………………………….…………… 34 3-6) پارامترهای الکتروفیزیولوژیک مورد مطالعه …………………………………………… 34 3-7) آزمون آماری ………………………………………………………………………………………. 36 فصل چهارم: نتایج 4-1) ویژگی های فعالیت خودبخودی و برانگیخته نورون های حلزون در شرایط کنترل…………………………………………………………………………………………………………… 38 4-2) اثرات غلظتهای 1/0 و 2/0 میلیمولار لینالول بر ویژگیهای الکتروفیزیولوژیک نورونهای حلزون ………………………………………………………………………………………….. 39 4-2-1) ویژگی های پتانسیل عمل خود بخودی در حضور لینالول 1/0 میلی مولار 39 4-2-2) ویژگی های پتانسیل عمل خودبخودی در حضور لینالول 2/0 میلی مولار .47 4-3) ویژگی های پتانسیل عمل خودبخودی در حضور لینالول و مهار کننده های کانال های کلسیمی نیکل کلرید و نیفدیپین …………………………………………………….. 51 4-4) ویژگی های پتانسیل عمل خودبخودی در حضور لینالول و مهارکنندههای پروتئین کینازها،کلریترین و H89 …………………………………………………………………… 53 فصل پنجم: بحث و نتیجه گیری 5-1) بحث …………………………………………………………………………………………………….. 57 5-1-1) تغییر در ویژگی های پتانسیل عمل در حضور لینالول …………………………… 57 5-1-2) تغییر در فعالیت نورونی و بروز الگوی burst در حضور لینالول………..……….60 5-2) نتیجه گیری …………………………………………………………………………………………. 63 5-3) پیشنهادات برای مطالعات آینده ……………………………………………………………. 63 فهرست منابع و ماخذ …………………………………………………………………………………….. 65 فهرست شکلها عنوان…………………………………………………………………………………………………………صفحه شکل 3-1. حلزون باغی …………………………………………………………………………………. 30 شکل 3-2.گانگلیون تحت مری تثبیت شده در محفظه ثبت …………………………….. 31 شکل 3-3. نمایی از وسایل ثبت داخل سلولی ……………………………………………….. 33 شکل 3-4. نحوه اندازه گیری برخی پارامترهای پتانسیل عمل ………………………… 35 شکل4-1. الگوی فعالیت خودبخودی نورون در شرایط کنترل، 5 و 10 دقیقه پس از مجاورت با غلظت 1/0 میلی مولار لینالول ………………………………………………………… 40 شکل 4-2. مقایسه پتانسیل ثبت شده از یک نورون در سه زمان کنترل، 5 دقیقه و 10 دقیقه پس از افزودن لینالول ……………………………………………………………………… 42 شکل 4-3. الگوی فعالیت خودبخودی در شرایط کنترل، 3 دقیقه پس از مجاورت با غلظت 2/0 میلی مولار لینالول و پس از شستشوی محفظه حاوی لینالول با رینگر نرمال حلزون ……………………………………………………………………………………………….. 48 شکل4-4. مقایسه پتانسیل ثبت شده از یک نورون در دو زمان کنترل و 2 دقیقه پس از افزودن لینالول 2/0 میلی مولار ……………………………………………………………………..49 شکل 4-5. پس از بروز فعالیت burst در نتیجه افزودن لینالول 2/0 میلی مولار NiCl به محفظه ثبت اضافه گردید ………………………………………………………………………….. 52 شکل 4-6. پس از بروز فعالیت burst در نتیجه افزودن لینالول 2/0 میلی مولار، نیفدیپین به محفظه ثبت اضافه گردید ……………………………………………………..…….. 53 شکل 4-7. پس از بروز فعالیت burst در نتیجه افزودن لینایول 2/0 میلی مولار، H89 به محفظه ثبت اضافه گردید ………………………………………………………..……..………… 54 شکل 4-8. پس از بروز فعالیت burst در نتیجه افزودن لینالول 2/0 میلی مولار، کلریترین به محفظه ثبت اضافه گردید ……………………………………………….………….. 55 فهرست نمودارها و جدولها عنوان…………………………………………………………………………………………………………صفحه نمودار 4-1. مقایسه میانگین پتانسیل استراحت غشاء و فرکانس پتانسیل عمل در شرایط کنترل و در 5 و 10 دقیقه پس از افزودن غلظت 1/0 میلی مولار لینالول به رینگر حلزونی نرمال………………………………………………………………………………………..39 نمودار 4-2. مقایسه استانه و دامنه در پتانسیل عمل ثبت شده در حضور غلظت 1/0 میلی مولار لینالول …………………………………………………………………………………………. 41 نمودار 4-3. مقایسه میانگین سطح زیر منحنی، فاصله بین پتانسیلهای عمل و طول مدت پتانسیل عمل در شرایط کنترل و در 5 و 10 دقیقه پس از افزودن غلظت 1/0 میلی مولار لینالول به رینگر حلزونی نرمال (8=n) ………………………………………….. 43 نمودار 4-4. مقایسه میانگین دامنه AHP و طول مدت AHP بین سه حالت کنترل، 5 و 10 دقیقه پس از کاربرد لینالول 1/0 میلی مولار (8=n) …………………………………… 44 نمودار 4-5. مقایسه میانگین شیب فاز دپلاریزاسیون و شیب فاز رپلاریزاسیون بین سه حالت کنترل، 5 و 10 دقیقه پس از افزودن لینالول 1/0 میلی مولار (8=n) …….. 45 نمودار 4-6. مقایسه میانگین مدت دوره مهاری بعد از فعالیت برانگیخته پس از تزریق جریان های دپلاریزان (nA1-2) در شرایط کنترل و 10 دقیقه پس از افزودن غلظت 1/0 میلی مولار لینالول به رینگر حلزونی نرمال (6=n) ……………………………………………. 46 نمودار 4-7. مقایسه آستانه و دامنه در پتانسیل های عمل ثبت شده در حضور غلظت 2/0 میلی مولار لینالول(6=n) …………………………………………………………………………. 47 نمودار 4-8.مقایسه میانگین شیب فاز دپلاریزاسیون و شیب فاز رپلاریزاسیون بین دو حالت کنترل و 2 دقیقه پس از افزودن لینالول 2/0 میلی مولار (8=n). ………….. 49 نمودار 4-9. مقایسه میانگین مدت دوره مهاری بعد از فعالیت برانگیخته پس از تزریق جریانهای دپلاریزان(nA2-1) در شرایط کنترل و در 10 دقیقه پس از افزودن غلظت 2/0 میلی مولار لینالول به رینگر حلزونی نرمال (6=n)……………………………………….50 جدول 4-1. مقاومت ورودی سلول در شرایط کنترل و 10 دقیقه پس از کاربرد لینالول 1/0 میلی مولار ……………………………………………………………………………………………… 47 جدول 4-2. مقاومت ورودی سلول در شرایط کنترل و 10 دقیقه پس از کاربرد لینالول 2/0 میلی مولار ……………………………………………………………………………………………… 50 بیان مساله
[پنجشنبه 1398-06-28] [ 09:31:00 ق.ظ ]
لینک ثابت |