دانلود پایان نامه ارشد:جداسازی، تشخیص و تعیین گروه های آناستوموزی ریزوکتونیا از خاک مزارع، خزانه ها، منابع کودی و خاک-های مخلوط در شهرستان شیراز | ... | |
استاد راهنما چکیده جداسازی، تشخیص و تعیین گروههای آناستوموزی ریزوکتونیا از خاک مزارع، خزانهها، منابع کودی و خاکهای مخلوط در شهرستان شیراز به کوشش ریحانه رحیمینژاد ریزوکتونیا از جمله قارچهای بازیدیومیست خاکزی است که در بیشتر خاکها بصورت غیر یکنواخت وجود دارد. جمعیت این قارچ در خاک پایین است لذا جداسازی آن از خاک مشکل است. گونهی Rhizoctonia solani با گروه آناستوموزی AG-2 و AG-4 مهمترین بیمارگر گیاهان زینتی در شیراز است اما منبع آلودگی گیاهان زینتی به این قارچ کاملا مشخص نیست. در طی سالهای 1392 و 1393 از خزانههای گلها و گیاهان زینتی قصرالدشت، کفترک، داریون، باجگاه، پارکها، بلوارها و میدانهای شهرستان و دامنهی کوهها در منطقهی باجگاه نمونهبرداری انجام شد. نمونهها شامل خاکهای زراعی و غیر زراعی، کودهای حیوانی، برگی و کارخانهای، خاکهای مخلوط و آمیختههای خاکی شامل کوکوپیت و ورمیکمپوست بودند. روش جداسازی از خاک و محیط کشت آن بهینهسازی شد، به این صورت که نمونههای خاک از الک دو میلیمتری عبور داده و به مدت یک شبانهروز در دمای اتاق هواخشک شدند. 40 گرم از هر نمونهی خاک مرطوب شد، که بطور متوسط رطوبت آن، 20 درصد برآورد شد.20 گرم آن درون ظرفهای یکبار مصرف کاسهای دربدار ریخته و 60 عدد بذر چغندرقند که به مدت 30 دقیقه روی هیتر جوشانده شده بود به عنوان طعمه، روی آن چیده و توری نایلونی با سوراخهایی با اندازه کمتر از یک میلیمتر طوری قرار داده شد که مقداری از توری از لبههای ظرف بیرون باشد. بقیهی 20 گرم خاک روی توری ریخته و درب آن بسته شد. ظروف به مدت 72 ساعت در انکوباتور 25 درجه سانتیگراد نگهداری و بذور پس از شستشو و ضدعفونی سطحی با مایع سفیدکننده تجاری ده درصد روی محیط کشت PDA حاوی 100 پیپیام PCNB، 100 پیپیام کلرامفنیکل و 50 پیپیام Hymexazole کشت شدند. 218 جدایهی ریزوکتونیا از نمونهها بدست آمد و پس از شمارش تعداد هسته در هر سلول و تعیین قطر ریسه، 193 جدایه چندهستهای و 25 جدایه دوهستهای بودند. گروه آناستوموزی 50 جدایهی چندهستهای به روش باندونی و با داشتن 18 گروه آناستوموزی استاندارد تعیین شد. دوازده گروه آناستوموزی شامل AG-1-1A، AG-2، AG-2-2، AG-2-2C، AG-2-2IIIB، AG-3، AG-4، AG-5، AG-7، AG-11، AG-13 و AG-BI شناسایی شدند. ویژگیهای مورفولوژیکی شامل شکل و رنگ پرگنه، شکل، رنگ و چگونگی تشکیل اسکلروت در محیط کشت و دمای بهینه رشد تعیین شد. اثبات بیماریزایی جدایهها روی گیاهان چغندرقند، گندم و نخود در شرایط گلخانه بررسی و تعداد گیاهان مرده شمارش شد. همهی گروههای آناستوموزی مایهزنی شده به نخود، روی این گیاه، بیماریزا بودند و همچنین AG-2، AG-2-2، AG-2-2C، AG-2-2IIIB، AG-4، AG-7 و AG-11 روی گیاه چغندرقند بیماریزا بودند. در هر دو گیاه، بیشترین درصد گیاهان مرده، در اثر مایهزنی AG-2-2 بود. علائمی روی گیاه گندم مشاهده نشد. درصد فراوانی گروههای آناستوموزی R.solani در خاک شهرستان تعیین شد، به این صورت که AG-4 (36%)، AG-2 (18%)، AG-1-1A (18%)، AG-2-2IIIB (6%)، AG-3 (4%)، AG-2-2 (4%)، AG-13 (4%)، AG-2-2C (2%)، AG-5 (2%)، AG-7 (2%)، AG-11 (2%) در خاکهای زراعی و AG-BI (2%) در خاک بکر بودند منابع کودی، خاکهای مخلوط و آمیختههای خاکی عاری از عامل بیماری بودند و منبع آلودگی، نشاءهای خزانههای گلها و گیاهان زینتی تعیین شد. کلمات کلیدی: جداسازی، محیط کشت، R. solani، گروههای آناستوموزی
فهرست مطالب
عنوان صفحه فصل اول مقدمه………………………………………………………………………………………………… 2 اهداف پژوهش………………………………………………………………………………. 4
فصل دوم مروری بر پژوهشهای پیشین…………………………………………………… 6 2- 1- جداسازی ریزوکتونیا از خاک…………………………….. 6 2-1-1- جداسازی ریزوکتونیا از خاک به روش طعمه گذاری 6 2-1-2- جداسازی ریزوکتونیا از خاک به روش محیط کشت 8 2-1-3- جداسازی ریزوکتونیا از خاک به روش غربال 10 2-1-3-1- روش غربالگری خشک……………………………………… 10 2-1-3-2- روش غربالگری تر………………………………………… 10 2-1-3-3- روش غربالگری و شناور شدن…………………. 11 2-1-4- جداسازی ریزوکتونیا از خاک به روش کاغذ صافی 11 2-1-5- جداسازی ریزوکتونیا از خاک به روش لولههای غوطهور در خاک……………………………………………………………………………………………. 11 2-2- جداسازی ریزوکتونیا از مواد آلی………………… 12 2-3- گروههای آناستوموزی ریزوکتونیا………………….. 13 2-4- گزارش برخی از گروههای آناستوموزی R. solani از برخی گیاهان در دنیا……………………………………………………………………………………… 14 2-5- گزارش برخی گروههای آناستوموزی ریزوکتونیا از برخی گیاهان در ایران…………………………………………………………………………………… 15 2-6- تعیین گروههای آناستوموزی ریزوکتونیا……. 16 عنوان صفحه
فصل سوم مواد و روشها…………………………………………………………………………….. 20 3-1- نمونهبرداری……………………………………………………………….. 20 3-2- بهینهسازی روش جداسازی ریزوکتونیا از خاک و کود 28 3-2-1- تهیهی مایه برای آزمونهای بهینهسازی 28 3-2-2- آزمونهای انجام شده در زمینهی طعمهگذاری 28 3- 2- 2- 1- طعمهگذاری به روش خلال دندان…… 28 3- 2- 2- 2- طعمهگذاری به روش بذر چغندرقند 29 3- 2- 2- 2- 1- بهینهسازی روش تهیهی بذر چغندرقند 29 3- 2- 2- 2- 2- بهینهسازی مدت زمان نگهداری طعمه در خاک 30 3- 2- 2- 2- 3- بهینهسازی دمای نگهداری خاک و طعمه 31 3- 2- 2- 2- 4- بهینهسازی تعداد طعمهی بذر چغندرقند در خاک 31 3- 2- 2- 2- 5- بهینهسازی تیمار طعمهها پس از خارج کردن از خاک……………………………………………………………………………………………. 31 3- 2- 2- 2- 6- استفاده از توری در ظروف نگهداری خاک و طعمه……………………………………………………………………………………………………. 32 3- 2- 2- 2- 7- بررسی کارایی روش طعمهگذاری با بذر چغندرقند در خاک طبیعی مخلوط با مایهی ریزوکتونیا…….. 32 3-3-3- آزمونهای انجام شده در زمینه روش محیط کشت 33 3- 3- 3- 1- ریختن خاک روی محیط کشتهای نیمه انتخابی ریزوکتونیا و محیط کشت عمومی PDA………………………. 33 3- 3- 3- 2- افزودن قارچکش به محیط کشت……….. 33 3-3- جداسازی ریزوکتونیا از خاک…………………………….. 34 3-4- جداسازی ریزوکتونیا از مادهی آلی خاک……. 35 3- 5- جداسازی ریزوکتونیا از خاک عاری از مادهی آلی 35 3- 6- جداسازی ریزوکتونیا از انواع کود و آمیختههای خاکی 35 عنوان صفحه
3-7- خالصسازی و نگهداری جدایههای ریزوکتونیا 36 3-8- رنگآمیزی و شمارش هستهی ریزوکتونیا و تعیین قطر ریسه 36 3-9- تعیین گروههای آناستوموزی جدایههای ریزوکتونیا 37 3- 10- تعیین مشخصات مورفولوژیکی جدایههای Rhizoctonia solani 38 3- 10- 1 – تعیین مشخصات پرگنه……………………………. 38 3- 10- 2- تعیین مشخصات اسکلروت…………………………. 38 3- 10- 3- تعیین دمای بهینهی رشد……………………. 39 3-11- مطالعات بیماریزایی…………………………………………… 39 3- 11- 1- تهیهی مایهی قارچ…………………………………… 39 3- 11- 2- کاشت بذر و مایهزنی به گیاهان…….. 39
فصل چهارم نتایج……………………………………………………………………………………………… 42 4- 1- بهینهسازی روش جداسازی ریزوکتونیا از خاک و کود 42 4- 1- 1- آزمونهای انجام شده در زمینهی طعمهگذاری 42 4- 1- 1- 1- طعمهگذاری به روش خلالدندان…….. 42 4- 1- 1- 2- طعمهگذاری به روش بذر چغندرقند 42 4- 1- 1- 2- 1- بهینهسازی روش تهیهی بذر مردهی چغندرقند 42 4- 1- 1- 2- 2- بهینهسازی مدت زمان نگهداری طعمه در خاک 43 4- 1- 1- 2- 3- بهینهسازی دمای نگهداری خاک و طعمه 43 4- 1- 1- 2- 4- بهینهسازی تعداد طعمهی بذر چغندرقند در خاک 44 4- 1- 1- 2- 5- بهینهسازی تیمار ضدعفونی سطحی طعمهها پس از خارج کردن از خاک……………………………………………………………. 44
عنوان صفحه
4- 1- 1- 2- 6- بررسی کارایی روش طعمهگذاری با بذر چغندرقند در خاک طبیعی مخلوط با مایهی ریزوکتونیا…….. 44 4-1-2- آزمونهای انجام شده در زمینه روش محیط کشت 45 4- 1- 2- 1- ریختن خاک روی محیط کشتهای نیمه انتخابی ریزوکتونیا و محیط کشت عمومی PDA………………………. 45 4- 1- 2- 2- افزودن قارچکش به محیط کشت……….. 45 4-2- جمعبندی نتایج جداسازی ریزوکتونیا از خاک 46 4- 3- جداسازی ریزوکتونیا از خاک عاری از مادهی آلی 47 4-4- جداسازی ریزوکتونیا از مادهی آلی خاک……. 47 4- 5- جداسازی ریزوکتونیا از انواع کود و آمیختههای خاکی 47 4-6- رنگآمیزی، شمارش هسته در سلول و تعیین قطر ریسهی جدایههای ریزوکتونیا………………………………………………………………………………. 47 4-7- تعیین گروههای آناستوموزی و مشخصات مورفولوژیکی جدایههای Rhizoctonia solani…………………………………………………………………………….. 54 4- 8- مطالعات بیماریزایی…………………………………………… 60
فصل پنجم بحث…………………………………………………………………………………………………… 79 پیشنهادها………………………………………………………………………………… 90 منابع……………………………………………………………………………………………… 91 منابع فارسی………………………………………………………………………….. 91 منابع انگلیسی…………………………………………………………………… 93 چکیده و صفحهی عنوان به زبان انگلیسی
فهرست جدولها
عنوان صفحه
جدول شمارهی 2-1 گزارش برخی از گروههای آناستوموزی Rhizoctonia solani از برخی گیاهان در دنیا………………………………………………………………….. 14 جدول شمارهی 2-2 گزارش برخی از گروههای آناستوموزی Rhizoctonia solani از برخی گیاهان در ایران………………………………………………………… 16 جدول 3-1 – مشخصات جدایههای ریزوکتونیا، جمعآوری شده از نقاط مختلف شهرستان شیراز…………………………………………………………………. 21 جدول 3-2 شناسهی جدایههای ریزوکتونیا، جمعآوری شده از نقاط مختلف شهرستان شیراز……………………………………………………………………………….. 27 جدول 4-1 درصد بذرهای آلوده چغندرقند به ریزوکتونیا در استفاده از تعداد مختلف بذر در 40 گرم خاک آلوده…………………………. 44 جدول 4-2 میانگین تعداد هسته و قطر ریسهی (میکرومتر) جدایههای بدست آمده………………………………………………………………………………………….. 48 جدول 4-3 شناسهی جدایههای ریزوکتونیا، جمعآوری شده از نقاط مختلف شهرستان شیراز……………………………………………………………………………….. 53 جدول 4- 4 گروه آناستوموزی و مشخصات مورفولوژیکی 50 جدایهی Rhizoctonia solani……………………………………………………………………………………… 54 جدول 4-5 درصد گیاهان مرده در اثر مایهزنی 12 نوع گروه آناستوموزی Rhizoctonia solani به گیاهان چغندرقند و نخود………………………. 60
فهرست نمودارها
عنوان صفحه
نمودار 4-1 درصد فراوانی جدایههای Rhizoctonia solani جداسازی شده از نقاط مختلف شهرستان شیراز………………………………………………….. 59 نمودار 4-2 درصد گیاهان مرده در اثر مایهزنی 12 گروه آناستوموزی Rhizoctonia solani در گیاه چغندرقند………………………………………… 61 نمودار 4-3 درصد گیاهان مرده در اثر مایهزنی 12 گروه آناستوموزی Rhizoctonia solani در گیاه نخود…………………………………………………. 61
فهرست شکلها
عنوان صفحه
شکل 3-1 استفاده از خلال دندان به عنوان طعمه برای جداسازی ریزوکتونیا از نمونههای خاک…………………………………………… 63 شکل 3-2 استفاده از بذر جوانهزدهی چغندرقند به عنوان طعمه برای جداسازی ریزوکتونیا از نمونههای خاک……………………….. 63 شکل 3-3 استفاده از توری در ظروف نگهداری نمونههای خاک و طعمه………………………………………………………………………………………………………………. 63 شکل 3-4 ریختن نمونههای خاک روی محیط کشتهای کو و هورا مختلف 64 شکل 3-5 جداسازی ریزوکتونیا از مواد آلی خاک و کشت روی محیط کشت بهینهسازی شده……………………………………………………………………………. 64 شکل 3-6 نگهداری جدایههای ریزوکتونیا در لوله و شیشههای دربدار………………………………………………………………………………………………………………. 64 شکل 3-7 تعیین قطر ریسه و تعداد هسته در هر سلول به روش باندونی……………………………………………………………………………………………………………… 65 شکل 3-8 تعیین گروههای آناستوموزی جدایههای ریزوکتونیا 65 شکل 4- 2 AG-BI. پرگنهی جوان دارای دوایر متحدالمرکز نامنظم و نزدیک به هم. پرگنهی پیر…………………………………………………… 67 شکل 4- 3 AG-4 . پرگنهی پیر. پرگنهی جوان بصورت تخت و پودری. اسکلروت (از چپ به راست)………………………………………………….. 67 شکل 4- 4 AG-5. پرگنهی پیر. پرگنهی جوان. اسکلروت (از چپ به راست)……………………………………………………………………………………………………………… 68 شکل 4- 5 AG-1-1A. پرگنهی پیر و جوان (1). اسکلروت (2). تشکیل اسکلروتهای بزرگ و به تعداد کم اطراف بلوک قارچ (3) 68 شکل 4- 6 AG-2C-2. پرگنهی پیر. پرگنهی جوان. اسکلروت (از چپ به راست)…………………………………………………………………………………………………. 68 شکل 4- 7 AG-2. پرگنهی پیر. پرگنهی جوان. اسکلروت (از چپ به راست)……………………………………………………………………………………………….. 69 شکل 4- 8 AG-11. پرگنهی پیر. پرگنهی جوان. اسکلروت (از چپ به راست)……………………………………………………………………………………………….. 69 شکل 4- 9 AG-3. پرگنهی پیر. پرگنهی جوان. اسکلروت (از چپ به راست)……………………………………………………………………………………………….. 69 عنوان صفحه
شکل 4- 10 AG-2-2IIIB. تفاوت در رنگ پرگنه (1). پرگنهی پیر و جوان (2). اسکلروت (3)……………………………………………………………………… 70 شکل 4- 11 AG-13. پرگنهی پیر و جوان. پرگنهی جوان دارای دوایر متحدالمرکز منظم. اسکلروت (از چپ به راست)………… 70 شکل 4- 12 AG-2-2. پرگنهی پیر و جوان. اسکلروت (از چپ به راست). 70 شکل 4- 13 مقایسهی گلدان گیاه چغندرقند مایهزنی شده با AG-1-1A و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست)……………………………………………………………………………………………….. 71 شکل 4- 14 مقایسهی گلدان گیاه چغندرقند مایهزنی شده با AG-2 و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست)……………………………………………………………………………………………….. 71 شکل 4- 15 مقایسهی گلدان گیاه چغندرقند مایهزنی شده با AG-2-2 و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست)…………………………………………………………………………………………………. 71 شکل 4- 16 مقایسهی گلدان گیاه چغندرقند مایهزنی شده با AG-2-2C و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست)…………………………………………………………………………………………………. 71 شکل 4- 17 مقایسهی گلدان گیاه چغندرقند مایهزنی شده با AG-2-2IIIB و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست)…………………………………………………………………………………………………. 72 شکل 4- 18 مقایسه گلدان گیاه چغندرقند مایهزنی شده با AG-3 و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست)…………………………………………………………………………………………………. 72 شکل 4- 19 مقایسهی گلدان گیاه چغندرقند مایهزنی شده با AG-4 و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست)…………………………………………………………………………………………………. 72 شکل 4- 20 مقایسهی گلدان گیاه چغندرقند مایهزنی شده با AG-5 و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست)…………………………………………………………………………………………………. 72 شکل 4- 21 مقایسهی گلدان گیاه چغندرقند مایهزنی شده با AG-7 و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست)…………………………………………………………………………………………………. 73 شکل 4- 22 مقایسهی گلدان گیاه چغندرقند مایهزنی شده با AG-11 و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست)…………………………………………………………………………………………………. 73
عنوان صفحه
شکل 4- 23 مقایسهی گلدان گیاه چغندرقند مایهزنی شده با AG-13 و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست)…………………………………………………………………………………………………. 73 شکل 4- 24 مقایسهی گلدان گیاه چغندرقند مایهزنی شده با AG-BI و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست)…………………………………………………………………………………………………. 73 شکل 4- 25 مقایسهی گلدان گیاه نخود مایهزنی شده با AG-1-1A و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست) 74 شکل 4- 26 مقایسهی گلدان گیاه نخود مایهزنی شده با AG-2 و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست) 74 شکل 4- 27 مقایسهی گلدان گیاه نخود مایهزنی شده با AG-2-2و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست) 74 شکل 4- 28 مقایسهی گلدان گیاه نخود مایهزنی شده با AG-2-2Cو شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست) 75 شکل 4- 29 مقایسهی گلدان گیاه نخود مایهزنی شده با AG-2-2IIIBو شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست). 75 شکل 4- 30 مقایسهی گلدان گیاه نخود مایهزنی شده با AG-3و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست). 75 شکل 4- 31 مقایسهی گلدان گیاه نخود مایهزنی شده با AG-4و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست). 76 شکل 4- 32 مقایسه گلدان گیاه نخود مایهزنی شده با AG-5و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست). 76 شکل 4-33 مقایسه گلدان گیاه نخود مایهزنی شده با AG-7و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست). 76 شکل4- 34 مقایسهی گلدان گیاه نخود مایهزنی شده با AG-11و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست) 77 شکل 4- 35 مقایسهی گلدان گیاه نخود مایهزنی شده با AG-13 و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست) 77
عنوان صفحه
شکل 4- 36 مقایسهی گلدان گیاه نخود مایهزنی شده با AG-BI و شاهد. مقایسهی ریشهی گیاه شاهد و گیاه مایهزنی شده (از چپ به راست) 77
فصل اول
مقدمه
ریزوکتونیا از جمله قارچهای بازیدیومیست خاکزی است که بیماریهای شدیدی در میزبانهای خود بوجود میآورد و در بسیاری از اندامهای گیاهی از جمله ریشه، طوقه، ژوخه[1]، پداژه[2] و دیگر اندامهای گیاهی که بر سطح یا درون خاک میرویند، باعث آلودگی میشود. بیماریهای ریزوکتونیایی در سرتاسر جهان شیوع دارند. این قارچها قادرند به صدها نوع مختلف گیاهان حمله و طیف وسیعی از بیماریها را ایجاد کنند. جدایههای این قارچ از روی بیش از 150 گونهی مختلف گیاهی جدا شده اند (Boysen et al., 1996). میزبان آن سبزیها و گلها، تعدادی گیاه زراعی، انواع چمنها، گیاهان زینتی چندساله، درختچهها و درختان است. معمولیترین نشانه های بیماریهای ریزوکتونیایی به صورت مرگگیاهچه در داننهالها، پوسیدگی ریشه و ساقه، شانکر ساقه و پوسیدگی اندامهای ذخیرهای است.(Agrios, 2005) این قارچ در ایران از روی 104 میزبان گزارش شده است (ارشاد، 1388). آنامورف[3] این قارچ با خصوصیاتی مشخص میشود که عبارت است از وجود بند دلیپور[4] در دیوارهی عرضی، شکل گیری انشعاب در نزدیکی محل دیوارهی عرضی و فرورفتگی ریسه در محل انشعاب، وجود دیوارهی عرضی در انشعاب ایجاد شده، انشعابات 90 درجه، عدم وجود قوس اتصال، عدم وجود اسپور، عدم وجود ریشه نما[5]، ریسههای رنگدانهدار، تولید اسکلروت[6] و سلولهای زنجیروار[7] است (Singleton et al., 1992). این قارچ در بیشتر خاکها وجود دارد و وقتی در مزرعهای مستقر شد، به مدت نامحدود در آن باقی میماند. انتشار این قارچ از طریق باران، آب آبیاری، یا سیلاب، ابزار و هر
[جمعه 1398-07-12] [ 03:58:00 ب.ظ ]
لینک ثابت
|